immunoelektroforese

De immunoelektroforese brukes til laboratoriediagnostisk påvisning av monoklonale antistoffer i pasientens blod. Monoklonale antistoffer er avledet fra den samme cellen og er rettet mot de samme antigenene. Av denne grunn skal de vurderes som patologiske og, hvis de er bevist, tale for sykdommer som Waldenströms sykdom.

Hva er immunelektroforese?

Joner har ulik mobilitet. Denne forskjellige mobiliteten danner grunnlaget for elektrofereseprosedyren. Disse metodene skiller forskjellige stoffer fra hverandre ved bruk av elektriske felt og tyngdekraft. En velkjent metode på dette området er immuno-elektroferese.

Dette er en kvalitativ diagnostisk metode som brukes til å påvise monoklonale antistoffer. Antistoffer er immunologisk aktive proteinstoffer fra en spesifikk cellelinje. Monoklonale antistoffer er alle basert på de samme B-lymfocytter og er derfor rettet mot en enkelt epitop. Hver naturlig immunrespons på invaderende antigener tilsvarer en polyklonal respons og er derfor rettet mot forskjellige epitoper. En monoklonal immunrespons gir derfor indikasjoner på patologiske kroppsprosesser.

Monoklonale antistoffer binder forskjellige molekyler med høy spesifisitet. Denne bindingen kan demonstreres ved hjelp av immunoelektroforese. Prosedyren er en kvalitativ prosedyre i laboratoriediagnostikk og består av de to typene prosedyrer, serumelektroforese og immunodiffusjon.

Funksjon, effekt og mål

Immunoelektroforese kombinerer metodikken for serumelektroforese med immunodiffusjon. Pasientens serum blir plassert på en agarosegel eller celluloseacetatfilm. Et kontrollserum påføres også. Påføringen følges av en elektroforetisk separasjon av prøvene. Antisera, IgG, IgA, IgM, eddiksyre for normal elektroforese og kappa og lambda påføres mellom skillelinjene.

Dette skaper en reaksjon med antistoffene i pasientens serum, noe som skaper nedbørlinjer. Avhengig av antiserumet som brukes og plasseringen og formen til de enkelte linjene, kan det trekkes konklusjoner om immunoglobulinene som er inneholdt i lette kjeder kappa eller lambda. Når det gjelder et lambdabånd er det gratis lette kjeder som består av antistoffer. Laboratoriet gir ytterligere bevis via de sjeldne IgE og IgD, som gjør det mulig å bestemme immunoglobulinene nøyaktig. En metode for immunodiffusjonselektroforese finner sted i henhold til Pierre Grabar og Curtis Williams og tilsvarer en kombinasjon av agarosegelelektroforese av proteiner og antistoffdiffusjon.

Først finner agarosegelelektroforese sted. Deretter diffunderer de inneholdte antistoffene mot båndene av antigener og skaper derved bunnfall av bunnfall. Dette skal skilles fra rakettimmunoelektroforese ifølge Laurell, som tilsvarer elektroforese av proteiner i en agarosegel, som hver har antistoffer i en viss konsentrasjon. Det er en litt basisk buffer i gelen, som bare lar antigenene vandre og som tvinger de fleste antistoffer til det isoelektriske punktet gjennom eksponering for den litt basale pH-verdien til de slutter å bevege seg elektroforetisk.

I begynnelsen av en rakettimmunoelektroforese er det et overskudd av antigen, slik at det dannes oppløselige antigen-antistoffkomplekser. Under elektroforese er det også binding mellom antigener og andre antistoffer. På denne måten dannes immunutfelling på ekvivalenspunktet, som ligner rakettlignende figurer med en høyde proporsjonal med antigenkonsentrasjonen. Høyden på bunnfallet måles for å evaluere testen.

Du finner medisinene dine her

Risiko, bivirkninger og farer

Påvisning av monoklonale antistoffer er av spesiell betydning for diagnosen myelomatose og Waldenströms sykdom. Bevisene som er gitt taler for en ondartet degenerasjon av immunceller. Multippelt myelom tilsvarer en kreft i benmargen, som er preget av den ondartede multiplikasjonen av antistoffproduserende celler i plasma.

Disse plasmacellene produserer antistoffer og deres fragmenter. Ondartede plasmaceller kommer alltid fra en vanlig forløpercelle og er derfor genetisk identiske. De produserer bare monoklonale antistoffer. Ondartigheten av denne sykdommen kan tilsvare et forstadierstadium, men den kan også nå et sterkt ondartet stadium, som uten behandling raskt er dødelig. Symptomer på sykdommen skyldes den ondartede veksten av cellene eller fra antistoffene og antistofffragmentene. De vanligste symptomene inkluderer smerter i bein, oppløsning av bein og spontane brudd.

Kalsiumnivået i blodet økes ofte. I tillegg blir de unormale antistoffene ofte avsatt i vevet og forårsaker funksjonsforstyrrelser i organene, noe som kan føre til symptomer som nyresvikt eller nedsatt blodstrøm. Waldströms sykdom er også en ondartet tumorsykdom. Mer presist er det en ondartet lymfom sykdom som regnes blant de langsomt fremgangsrike og nesten asymptomatiske B-celle lymfomer som ikke er Hodgkin. I de fleste tilfeller kan unormal produksjon av monoklonalt IgM på grunn av aktiviteten til de ondartede lymfomcellene påvises i sykdommen.

Waldenströms sykdom er ekstremt lik multiple myelom i sine egenskaper, men viser vanligvis et gunstigere forløp. De fleste pasienter med Waldenströms sykdom er i stor grad asymptomatiske når de blir diagnostisert. Andre pasienter viser symptomer tidlig, for eksempel uspesifikk tretthet eller perifere nevropatier, som er forårsaket av avsetning av monoklonalt IgM i myelinskjeden. Selv små mengder IgM kan utløse polyneuropati. Ingen polyneuropati forekommer hos andre pasienter, selv ikke på høye nivåer. I tillegg kan uspesifikke symptomer som feber, uønsket vekttap eller nattesvette oppstå. Beinsmerter er også karakteristisk.

På grunn av overproduksjon av IgM, blir blodet hypervisk, slik at de nevnte symptomene kan være assosiert med symptomene på et hyperviskøsitetssyndrom. I de fleste tilfeller manifesterer seg denne blødningen i hyppige neseblødninger, hodepine, generell ubehag eller tåkesyn og akustiske plager. For å oppdage ondartede sykdommer av denne typen, har immunoelektro forese lenge blitt en standard diagnostisk prosedyre.