ELISA

Av ELISA-test er en medisinsk laboratorieundersøkelse som resulterer i en såkalt antigen-antistoffreaksjon. Ulike antigener som spiller en rolle i human- eller veterinærmedisin, kan testes. I Tyskland får kun akkrediterte laboratorieinstitutter i oppdrag å utføre testen.

Hva er prosedyre?

ELISA-testen er en av de såkalte immunologiske metodene innen medisinske laboratorietester. Testprosedyren kan brukes til å påvise proteinmolekyler i en lang rekke kroppsvæsker.

ELISA er forkortelsen for Enzymbundet immunsorbentassay. Det er derfor et engelskspråklig navn, men det har blitt etablert innen tysk medisinsk bruk.

ELISA-testen er en av de såkalte immunologiske metodene innen medisinske laboratorietester. Testprosedyren kan brukes til å påvise proteinmolekyler i en lang rekke kroppsvæsker. Påvisningen av disse molekylene gjør det igjen mulig å trekke konklusjoner om visse sykdommer eller kliniske bilder, og det er grunnen til at leger også gjør diagnosen avhengig av resultatet av en slik ELISA-test. Testprosedyren er derfor veldig viktig i daglig klinisk praksis, poliklinisk eller poliklinisk.

De tilsvarende kroppsvæskene, for eksempel helblod eller væsker fra ledd, blir sendt direkte til laboratoriet etter at de er tatt fra pasienten. Prøvene er vanligvis veldig presserende, fordi det naturlige materialet anses som følsomt og bør undersøkes så snart som mulig. Såkalte overlagte prøver kan føre til falske negative resultater fordi de patologiske proteinene som skal oppdages i mellomtiden er redusert eller fullstendig brutt ned. Såkalt pre-analyse spiller en viktig rolle i ELISA; mistenkelige eller negative resultater bør gjentas igjen hvis det er kliniske symptomer.

Funksjon, effekt og mål

Testrør og såkalte mikrotiterplater er avgjørende for korrekt testing i et akkreditert medisinsk laboratorium. Disse platene med fine, halvkonkave innrykk er laget av spesiell plast og er belagt med et veldig spesifikt antistoff.

Hvis antigenet som skal påvises er til stede i en kroppsvæske som skal undersøkes, oppstår en spesifikk antigen-antistoffreaksjon i henhold til det såkalte lock and key-prinsippet. Laboratoriepersonalet kan legge inn prøvematerialet i platene enten manuelt ved hjelp av pipetter eller helt automatisk. I moderne medisinske laboratorieinstitutter brukes bare helautomatiske systemer til å utføre ELISA-diagnostikk.

Disse må imidlertid overvåkes av trent personell, medisinsk-tekniske laboratorieassistenter. Den såkalte interne og eksterne kvalitetskontrollen er også laboratoriets ansvar, overordnet til det medisinske personalet for laboratoriemedisin, infeksjonsepidemiologi og mikrobiologi. Etter det første forsøket, dvs. etter at materialet er blitt pipettert på platene, har de spesifikke antigenene i prøven, hvis de er til stede, allerede bundet til antistoffene på plastplaten.

Dette blir fulgt av en vaskesyklus med fysiologisk saltløsning for å fjerne forstyrrende faktorer som uønskede antigener eller proteiner fra partiet. Dette trinnet er veldig viktig for å unngå falske positive reaksjoner. Et antatt positivt resultat som tolkes feil av laboratoriet kan under visse omstendigheter få fatale konsekvenser for en pasient. I det andre trinnet av undersøkelsen blir et ytterligere antistoff, som er knyttet til et enzym, lagt til. Dette merkede antistoffet binder også til antigenet.

I et tredje og siste trinn tilsettes en spesiell fargestoff i en definert mengde, som brytes ned i større eller mindre grad av de gjenværende enzymrester. Bare det enzymet kan brytes ned som ikke tidligere har vært bundet til antigenet sammen med antistoffet. Det frie enzymet er i stand til å spalte det tilsatte fargestoffet. Den nøyaktige mengden av det delte fargestoffet kan bestemmes med en videre medisinsk laboratoriemetode, den såkalte fotometrien. Dette gjør det mulig å trekke en nøyaktig konklusjon om hvorvidt og hvor mye antigen som er til stede i et prøvemateriale.

ELISA-testen brukes ikke bare til den første diagnosen eller for å underbygge mistenkte diagnoser ved visse sykdommer og kliniske bilder, men også for å overvåke deres fremgang. Hvis antigenkonsentrasjonen i testen blir lavere i løpet av terapien, regnes terapien som vellykket.

Du finner medisinene dine her

➔ Medisiner for å styrke forsvaret og immunforsvaret

Risiko, bivirkninger og farer

ELISA-testen er spesielt informativ gjennom påvisning av antigene strukturer i kroppsvæsker. Testen tillater en såkalt kvalitativ, men også semikvantitativ og kvantitativ uttalelse om den antatte tilstedeværelsen av visse antigener i kroppsvæsker.

Helblod kan ikke brukes til undersøkelsen, bare blodserum. En direkte test på pasienten, for eksempel fra kapillærblodet i fingerspissen, er derfor, som med noen andre serologiske tester, hittil ikke mulig. I humanmedisin brukes ELISA-testen først og fremst for å oppdage antigener ved bakterielle, virale eller soppinfeksjoner. I tillegg blir alle positive resultater av hepatitt-serologien kontrollert igjen med en ELISA-test som standard.

Visse hormoner, som graviditetshormonet HCG, kan også bestemmes med ELISA-testen. Hvis visse komplikasjoner oppstår under graviditet, er presis kunnskap om konsentrasjonen av graviditetshormonet i blodet veldig nyttig diagnostisk og terapeutisk. Et annet indikasjonsområde for testen er påvisning av såkalte paraproteiner i urinen, da de for eksempel forekommer ved forskjellige tumorsykdommer som for eksempel myelomatose.

ELISA-testen gjennomføres fortsatt i mange laboratorieinstitutter i dag, men anses som utdatert av eksperter. Den enzymkoblede immunreaksjonen i ELISA-testen har i økende grad blitt erstattet de siste årene med radioaktivt merkede antistoffer som gir enda bedre kvantitative resultater. Disse testene er også kjent som RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Ytterligere spesifikke videreutviklingen av ELISA er lettkjemiske metoder som luminescens eller fluorescens.